最好使用行動式紫外線消毒器近距離移動照射，也可採取紫外燈懸吊式照射。對小件物品可放紫外線消毒箱內照射。
不同種類的微生物對紫外線的敏感性不同，用紫外線消毒時必須使用照射劑量達到殺滅目標微生物所需的照射劑量。
輻照劑量所用紫外線燈在照射物品表面處的輻照強度和照射時間的乘積。因此，根據紫外線光源的輻照強度，可以計算出需要照射的時間。
在使用過程中，應保持紫外線燈表面的清潔，一般每兩週用酒精棉球擦拭一次，發現燈管表面有灰塵、油汙時，應隨時擦拭。
用紫外線燈消毒室內空氣時。房間內應保持清潔於燥，減少塵埃和水霧，溫度低於20℃或高於40℃，相對溼度大於60％時應適當延長照射時間。
用紫外線消毒物品表面時，應使照射表面受到紫外線的直接照射，且應達到足夠的照射劑量；不得使紫外線光源照射到人，以免引起損傷。
