原因如下：
1、火燒比睿山城延歷寺，信奉佛教的明智光秀見到織田信長如此殘忍的手段，心中已對織田信長有所不滿。
2、丹波國的內亂，由當地大名波多野秀治發起，明智光秀被織田信長大罵一頓後又被削減領地，心中對織田信長更加不滿。
3、織田信長親自出徵丹波國，負隅頑抗的波多野家拼力死守，一時間攻城不下。織田信長提出願將明智光秀的母親做為人質抵押在城內，明智光秀母親到達後波多野兄弟等丹波豪士十六人如約出城赴會。沒想到等他們一到，織田信長下令立即將他們斬殺，並對八上城發動突襲。城破時，明智光秀的母親也已被火焚而死。自幼和母親流漓顛沛，相依為命的明智光秀聞訊後悲痛欲絕，心中已對織田信長恨之入骨。
4、明智光秀考慮到他現在已在織田信長眼中毫無價值，想到林秀真和佐久間信盛這兩位織田家重臣都先後被織田信長追放到蠻荒之地，生怕自己也落到這步田地，最終決意反叛。
