1、在5升三角燒瓶中，把2250克醋酸酐，在水浴上溫熱至35到40攝氏度。
2、換用25到30攝氏度的水浴，在攪拌下一小時內滴入過氧化氫、百分之三十到百分之三十五，500克，維持溫度在40攝氏度以下。在室溫放置過夜，所得溶液中含過氧乙酸濃度百分之六到百分之九。
3、若需要濃度高的過氧乙酸溶液，可用下法制備：
在10克冰醋酸和0.11毫升濃硫酸的混合液中，邊攪拌邊加入9、1克百分之九十的過氧化氫，溫度維持在22到23攝氏度。放置4小時後，過氧乙酸含量可達百分之四十四，12到15小時後後達百分之四十六。
