高壓蒸汽滅菌適用於培養基、金屬器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡膠及一些藥物的滅菌。高壓蒸汽滅菌，用高溫加高壓滅菌，不僅可殺死一般的細菌、真菌等微生物，對芽胞、孢子也有殺滅效果，是最可靠、應用最普遍的物理滅菌法。
注意事項：1、包裹不應過大、過緊，一般應小於30cm×30cm×50cm。
2、高壓鍋內的包裹不要排得太密，以免妨礙蒸氣透入，影響滅菌效果。
3、壓力、溫度和時間達到要求時，指示帶上和化學指示劑即應出現已滅菌的色澤或狀態。
4、易燃、易爆物品，如碘仿、苯類，禁用高壓蒸氣滅菌。
5、銳性器械，不宜用此法滅菌，以免變鈍。
6、瓶裝液體滅菌時，要用玻璃紙和紗布包紮瓶口，如有橡皮塞時，應插入針頭排氣。
