基本步驟:
目的基因的擴增、載體與目的基因雙酶切、電泳、割膠回收、目的基因與載體的連線反應、重組體篩選、驗證重組體、轉化入大腸桿菌進行表達。
問題在於:目的基因如何獲取,擴增策略的決定,表達載體的選擇,雙酶切選擇哪一對限制性內切酶,如何篩選重組體等等。
基本步驟:
目的基因的擴增、載體與目的基因雙酶切、電泳、割膠回收、目的基因與載體的連線反應、重組體篩選、驗證重組體、轉化入大腸桿菌進行表達。
問題在於:目的基因如何獲取,擴增策略的決定,表達載體的選擇,雙酶切選擇哪一對限制性內切酶,如何篩選重組體等等。