轉錄是遺傳資訊從DNA流向RNA的過程。關於轉錄是否需要解旋酶是有兩種觀點的，一種觀點認為轉錄不需要解旋酶，一種觀點認為轉錄需要解旋酶。
觀點一：轉錄不需要解旋酶
DNA複製需要解旋酶，可是與DNA複製相類似的轉錄過程並不需要解旋酶，基因的轉錄是由RNA聚合酶催化進行的。基因的上游具有結合RNA聚合酶的區域，叫做啟動子。啟動子是一段具有特定序列的DNA，具有和RNA聚合酶特異性結合的位點，決定了基因轉錄的起始位點。RNA聚合酶與啟動子結合後，在特定區域將DNA雙螺旋兩條鏈之間的氫鍵斷開，使DNA解旋，形成單鏈區，以非編碼鏈為模板合成RNA互補鏈的過程就開始了。
觀點二：轉錄需要解旋酶
在真核細胞中，RNA聚合酶通常不能單獨發揮轉錄作用，而需要與外切酶等其他轉錄因子共同協作，有些輔助功能的轉錄因子就是解旋酶。參與典型的真核生物轉錄開始過程的轉錄因子TFII-H和TFII-F有ATPase活性幫助轉錄起始複合物“撬開”DNA雙鏈，但是TFII-H隨後表現磷酸化活性，使得RNA聚合酶II從通用轉錄因子上釋放，執行轉錄延伸階段。
